肿瘤免疫疗法是一种强有力的肿瘤治疗手段，目前主要包括两大类，一是免疫检查点阻断疗法，通过释放免疫系统的刹车器来提高自身对肿瘤的杀伤力；另一种嵌合抗原受体（chimeric antigen receptors，CAR）T细胞疗法，通过改造T细胞提高其对肿瘤细胞的抗原识别和杀伤能力。同时还有一种免疫疗法也值得关注，双特异性抗体（bispecific T-cell engager， BiTE）治疗，BiTE抗体分子由两种单克隆抗体的单链可变结构域（single-chain fragment variables； scFvs）组成，分别可特异性识别靶细胞表面的抗原和T细胞表面的CD3分子，BiTE在结合靶细胞表面抗原和T细胞的CD3之后，可激活多克隆的细胞**T细胞的增殖，发挥细胞**作用进而杀伤靶细胞，且这种细胞**作用只依赖于靶细胞的存在与否，而不依赖TCR的特异性，共刺激分子或者抗原提呈的存在与否。BiTE也是肿瘤免疫治疗的有效手段之一，但和CART疗法类似，两者在血液系统肿瘤方面治疗比较有效，但对实体肿瘤的作用有限，如何提高CART或BiTE在实体瘤中的疗法是值得研究的问题。

       2019年7月22日，来自美国哈佛大学医学院麻省总医院的Marcela V. Maus团队在Nature Biotechnology上发表题为CAR-T cells secreting BiTEs circumvent antigen escape without detectable toxicity的文章，从胶质母细胞瘤 (glioblastoma， GBM) 模型入手，通过对CAR-T细胞的基因改造发现，由CAR-T细胞分泌的BiTEs能产生强有力的特异性抗肿瘤效应。

       胶质母细胞瘤（Glioblastoma ， GBM) 是最常见的脑部恶性肿瘤，同时也是致死率的。目前对胶质母细胞瘤的治疗有手术、放疗和化疗，但这些都只产生了部分疗效，且具有较强的毒副作用。一些针对GBM的CART免疫治疗试验正在进行，但由于GBM肿瘤抗原的异质性效果并不稳定。Marcela V. Maus团队前期也以表皮生长因子致癌突变EGFRvIII为靶点设计CAR-T细胞，在临床试验中，研究团队发现外周血回输CART-EGFRvIII可导致病人表达EGFRvIII肿瘤胶质母细胞的减少，但是表达野生型EGFR的肿瘤细胞依然存在。

       为解决肿瘤抗原异质性问题，提高机体对GBM的抗肿瘤效应，Marcela V. Maus团队在CART-EGFRvIII中引入抗野生型EGFR的BiTE（CART.BiTE）。研究团队以第二代CART-EGFRvIII为骨架，设计了两种CART.BiTE，两种BiTEs分别抗野生型EGFR或CD19，其中后者作为阴性对照，研究团队在体外证实设计改造CART分泌的BiTEs能结合相应靶标抗原上。

       之后研究人员在NSG免疫缺陷小鼠脑中注入EGFRvIII阳性和野生型 U87胶质瘤细胞，构建EGFR抗原异质性GBM肿瘤模型。与对照组相比，小鼠脑室内注射CART-EGFRvIII.BiTE-EGFR细胞实验组中，肿瘤细胞的生长明显降低。随后研究团队通过一系列的体外和小鼠模型试验，机制水平上发现CAR-T细胞分泌的BiTEs可以招募到旁观T细胞（未转导CART.BiTEs 的T细胞），并促进其发挥抗肿瘤功能。同时，BiTEs和CARs的共同刺激可使转导CART.BiTEs的T细胞更多向Tcm发育，且表达更低水平的衰竭分子如PD-1，TIM-3和LAG-3，CARs和BiTEs起到协同抗肿瘤作用。同时利用人皮肤异体移植试验，研究人员发现与CART-EGFR相比，CART-EGFRvIII.BiTE-EGFR组T细胞在组织中的浸润更少，展示了CART-EGFRvIII.BiTE-EGFR一定的安全性。

       与传统的CAR-EGFRvIII只识别EGFRvIII阳性肿瘤相比，CART-EGFRvIII.BiTE-EGFR不仅可以识别EGFRvIII阳性肿瘤还可以识别野生型EGFR阳性肿瘤细胞，同时也可招募旁观T细胞进一步发挥抗肿瘤效应。